酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在瘧疾流行病學(xué)調(diào)查中的應(yīng)用研究—ELSA目測(cè)法與電光比色法的比較
時(shí)間：2005-05-09
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獲1985年度云南省衛(wèi)生廳科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)
獲獎(jiǎng)?wù)撸航鹗缦?/SPAN> 楊品芳 李菊升 胡惠仙
云南省瘧疾防治研究所
隨著滅瘧運(yùn)動(dòng)的開(kāi)展，各種抗瘧藥物的大規(guī)模應(yīng)用，瘧疾流行的圖像起了復(fù)雜的變化。傳統(tǒng)的瘧疾流行病學(xué)調(diào)查方法（發(fā)病率、脾腫率、原蟲(chóng)率等）已不足及時(shí)、準(zhǔn)確地反映各地流行的性質(zhì)。世界衛(wèi)生組織（WHO）在總結(jié)不少地區(qū)和國(guó)家在消滅或控制瘧疾后，又重新受到瘧疾的侵襲這一教訓(xùn)時(shí)提出，重要的因素之一是由于缺乏一種靈敏的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。我省瘧疾防治工作經(jīng)過(guò)多年的努力， 大多數(shù)地區(qū)的瘧疾流行得到了有效控制，至84年止，全省54個(gè)縣發(fā)病率在1/萬(wàn)以下，22個(gè)縣為1-5/萬(wàn)， 在瘧疾處于低水平傳播的這類地區(qū)應(yīng)用一靈敏的監(jiān)測(cè)系統(tǒng)尤為重要，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)抗體具有較高的特異性和靈敏性，這在其它領(lǐng)域的研究與應(yīng)用中已得到證實(shí)，但該法在瘧疾流行病學(xué)調(diào)查中國(guó)內(nèi)甚少應(yīng)用。為了進(jìn)一步研究ELISA 在瘧疾現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查中的價(jià)值，盡快應(yīng)用該法作為瘧疾監(jiān)測(cè)的工具。我們按WHO介紹的ELISA間接法對(duì)瘧疾現(xiàn)癥病人，無(wú)瘧疾流行區(qū)的健康兒童，人工感染間日瘧經(jīng)根治后7─15 個(gè)月的志愿受試者及瘧疾流行區(qū)，控制暴發(fā)后兩年的地區(qū)；基本消滅瘧疾的地區(qū)中的人群進(jìn)行測(cè)試。在試驗(yàn)中所用抗原，結(jié)合物為本所自制，樣本均采用直徑為
在結(jié)果判定中，用自行設(shè)計(jì)的已知濃度的OPD顯色液作目測(cè)法的標(biāo)準(zhǔn)比色液，在1018人的ELISA結(jié)果判讀中，兩種比色法陽(yáng)性符合率為96.67%；陰性符合率為95.49%。在用兩種比色法對(duì)瘧疾流行區(qū)居民抗體水平測(cè)試中陽(yáng)性GMRT目測(cè)法334.76；光電比色法386.39。兩均數(shù)無(wú)顯著差異(P＞0.05)。表明目測(cè)法同樣能準(zhǔn)確地反映出人群中受感染瘧疾的程度，是一種簡(jiǎn)易經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確、適宜于基層推廣應(yīng)用的方法。2、對(duì)三種不同程度瘧疾流行區(qū)的調(diào)查結(jié)果，瘧疾流行地區(qū)的原蟲(chóng)率19.02%，抗體陽(yáng)性率97.93%，隨著年齡的增長(zhǎng)，抗體水平呈直線上升，控制暴發(fā)流行兩年及基本消滅瘧疾的地區(qū)，原蟲(chóng)率分別為0.47%及0，抗體陽(yáng)性率分別為6.98%、0.48% 。結(jié)果顯示應(yīng)用ELISA能客觀地反映出不同地區(qū)的瘧疾流行水平，人群抗體水平與防治措施之間的關(guān)系。表明此法可應(yīng)用于瘧疾現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查中，這對(duì)于準(zhǔn)確地了解各地區(qū)瘧疾流行動(dòng)態(tài)，作為指導(dǎo)制訂防治措施的參考指標(biāo)，考核防治效果將起到重要的作用。3、測(cè)定26例人工感染間日瘧志愿受試者經(jīng)根治后7 ─15 個(gè)月的抗體水平， 結(jié)果均為陰性。提示ELISA陽(yáng)性者可反映半年內(nèi)感染過(guò)瘧疾或近年內(nèi)感染過(guò)瘧疾而未得到徹底治療。
通過(guò)用兩種方法的比較顯示兩者都具有同樣的準(zhǔn)確性，目測(cè)法不需專用分光光度計(jì)，不受實(shí)驗(yàn)室條件限制，適宜于設(shè)備較差的基層使用，為我省在瘧疾防治工作中廣泛應(yīng)用ELISA這一高靈敏度，高特異性的新技術(shù)開(kāi)拓了新的前景。
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